1.斜面菌种的扩繁,斜面菌种的扩繁方法见第三章。
2.液体菌种制备,大规模的人工栽培一般采用液体菌种、种子罐菌种、液体深层发酵菌种。小批量的生产采用摇床或间歇人工摇瓶培养。
培养条件:一级摇瓶菌种一般利用500ml的锥形瓶,培养基装量100~150ml,一支斜面菌种可接4~5瓶,振荡频率150次/min,于22~25℃培养96h。二级摇瓶用1000ml的锥形瓶,装液量150~300ml,接种量10%,90次/min,振荡培养72~96h。当菌液为深棕色,有很浓郁的虫草味时就可感染虫体,根据菌液浓度(菌丝体或菌丝数量的多少),也可按1∶5~8的比例稀释后,装入喷雾器喷洒虫体感染。
若采用手工摇瓶,每天摇3~4次,每次20min,20℃培养5~8天。
3.虫体的饲养要进行蛹虫草的虫体栽培,必须饲养大量的寄主昆虫。蛹虫草的寄主较多,但目前人工栽培一般仅限于在家蚕及柞蚕蛹上进行。
4.接种与培养将液体菌种用微型喷雾器喷洒在幼虫体或蛹上,幼虫的食物中可混入虫草菌的菌丝体以增加感染的机会,喷洒时见湿为止。每天喷2次,3天后进行观察,受侵染的幼虫体出现行动迟缓,外壳颜色明显变化处于病态,即可进行栽培。
(1)瓶栽采用广口瓶或普通的罐头瓶。先在瓶底放一层2.5~3cm的细砂土,砂质含水60%左右,每瓶放入4~5只染菌的菌蛹,使其腹面向下,菌蛹之间有一定的间隔,上盖细砂土3cm左右,表面压平,并用塑料薄膜封口,以保持湿度。
(2)箱栽箱栽时先在箱底铺一层塑料薄膜,再铺细砂土5~7cm,再均匀地放入染菌的蛹体。每只蛹间距2~3cm,上再盖砂土3~5cm,表面用塑料薄膜覆盖保湿。
(3)床栽、畦栽、袋栽法与箱栽大同小异,不再赘述。
5.管理
(1)温度与湿度蛹虫草栽培入床(箱、瓶)之后到子座的形成阶段,最好保持20~25℃的恒温,才有利于蛹虫草子座的形成。温度不能有较大波动,否则会打乱菌丝生殖生长的规律,造成不出草。在原基形成之后,一定的温差刺激有利于子座的形成。
(2)水分应保持砂壤土及培养料的含水量50%~60%,使幼虫体不得干燥或水分过大而被其他微生物所利用。因此,在干燥时浇水要适当,要多次少喷、勤喷,这是水分管理的关键。
(3)空气与光线在子座将要形成时,要揭去薄膜,增加透气量,同时要保持空气相对湿度在85%左右。蛹虫草的栽培不需要强光,因此在室外栽培时要搭棚遮光,在子座逐渐生长发育时要保证一定的散射光,才有利于子座产量的提高。
6.采收蛹虫草成熟的标准是子座顶端露出土面高度2~8cm,直径2~5cm,呈橙黄色或棕红色,子座的上端有小小的突起物出现。这时可用镊子或铲子轻轻的扒开料土采收。采收到的蛹虫草子实体,用水洗净泥沙杂质,及时在太阳下晒干或烘干,保持子座与虫体完整,装入塑料袋封存。
蛹虫草人工培育技术
蛹虫草人工栽培的方式较多,以栽培的基质可以分为虫体栽培与代用料栽培两种。以栽培的容器来分,又可瓶栽、袋栽、床栽、畦栽等。
一、瓶栽法,利用广口瓶或罐头瓶作为栽培基质(虫体或代用料)的容器来培养蛹虫草的方法称瓶栽法。采用瓶栽法,菌丝体的生长、出草都在瓶内,杂菌污染少,成功率高,瓶内湿度容易保持,便于在农村推广。缺点是生产中比较费工,大规模栽培受到一定的限制。
二、袋栽法,采用聚丙烯或低压聚乙烯塑料袋装培养料、灭菌、接种、培养、菌丝发满后撑开塑料袋,让子座在袋内形成。采用袋栽法能充分利用灭菌设备,免去了洗瓶工艺,但管理比较麻烦。
三、床栽法,床栽多用于虫体栽培。一般室内设多层床架,每层用木板框或竹片做成。床架宽0.6~0.8m,长根据房间的大小而定。培养料有林下砂壤土60%,菜田中腐殖土30%,杂木屑10%,pH调至6.0~6.5,含水量50%~60%,床架底铺一层塑料薄膜,再铺培养料5~7cm,放入菌虫(已接种的虫体),每只菌虫之间相距2cm左右,再覆砂壤土3~5cm,其上盖塑料薄膜或阔叶树叶保湿。控制温度15~25℃,空气相对湿度60%~70%。在形成子座原基时,保持空气相对湿度80%,增加氧气和光照,有利于蛹虫草子座的生长与成熟。
四、畦栽法,适宜于广大的农村栽培。栽培的关键是选择好场地,要求土壤疏松,能排水、能遮阳、能防旱,能防人畜践踏。一般畦宽1m,深0.5m,长度不限。栽培时在畦底先铺0.6m厚的砂壤土,再放培养好的菌虫,其上覆土3~5cm,在畦上搭上弓棚以便起到遮阳、保湿和降温作用。
蛹虫草人工栽培有何优点?它对营养及环境条件有何要求?
蛹虫草又名蚕蛹虫草,因滋补、药用功效与冬虫夏草相近,正日渐成为冬虫夏草的理想替代品,受到人们的高度重视。
人工培育蛹虫草时,先将蛹虫草菌接种于培养基上,形成大量的分生孢子,再挑取分生孢子用无菌水制成孢子悬浊液,接种于宿主即蛹体上,保护蛹体直至僵硬。然后将僵硬的蛹体放在模拟蛹虫草自然生态条件下培养,从蚕蛹中长出的子座便同野生蚕蛹长的一模一样。
具体操作如下:
1、菌株的筛选 将蛹虫草通过活的蛹体进行复壮,进而筛选出对蚕蛹致病力强、易形成孢子的菌株。
2、孢子悬浊液的制作 菌株接种于培养基上,置20℃温度下培养,待出现分生孢子后,挑取一部分放在无菌水内制成孢子悬浊液待用。
3、宿主准备 将家蚕或蓖麻蚕上簇后烟熏消毒。一周后剖茧取蛹,剔除病蛹和不良蛹,选发育时期的健康蛹作宿主,也可直接选取上簇前的五龄蚕作宿主。
4、蛹虫草菌的感染 用接种针针尖蘸孢子悬浊液刺入蛹体,感染成功率可在95%以上。
5、感染蛹体的保护 染菌后的蛹体平摊于蚕匾或竹席上,室温下保护至蛹体僵硬。
6、子座的培育 模拟蛹虫草的自然生态环境,培养僵硬的蛹体长出于座。方法是在僵硬的蛹体上覆盖一层多孔材料,如碎海绵、细煤渣等,置于室温下、空气相对湿度为90%的环境中培养。
7、子座的定向培养 为使生出的子座长而硬,可采用定向培养。方法是,将僵硬的蛹头向上,插入多孔保温的材料如海绵中,放在前述温湿度及光照条件下培养。
8、蛹虫草的收集保存 子座成熟后,挖出清洗,用食用酒进行体表消毒,再放在60℃环境下烘乾,置阴凉干燥处密封保存。
由上述途径培养的蛹虫草,从接种到子座成熟约需35天-45天,每平方米培育面积可收获250克-300克。
据检测,人工培育的蛹虫草含有大量的虫草酸、虫草素、氨基酸、微量矿物元素和生物碱,可补精髓、抗肿瘤、镇静消炎、止血化痰,对肾炎、肝炎、哮喘、神经衰弱等疾病有明显疗效。
蛹虫草人工栽培的优点,一是投资少:最小规模投资1000元即可;二是占地少:最小规模生产场地只需20多米2,如立体层架栽培(图4-67),效益更高,一般农户室内即可生产;三是周期短:整个栽培周期只需60~80天;四是技术容易掌握;五是销路畅:市场需求量逐年扩大;六是利润高:一次栽培20米2,可产干成品5~10千克,收入4000元以上(按2002年市场价800元/千克计),一般一年可种3次。它对营养及环境条件的要求如下:
图4-67 瓶栽架式立体栽培
(1)营养
野生蛹虫草以夜蛾科昆虫蛹提供营养,人工栽培时可利用蛋白胨、酵母粉、尿素、各种蚕蛹粉、马铃薯、玉米浆等有机氮作为氮源,但无机氮、硝态氮则不能利用。碳源能利用糖、淀粉等,但以小分子糖类生长好。采用米饭、高粱、小米、马铃薯煮汁作为培养基均可培养出子座。适宜蛹虫草生长的碳氮比以3.5∶1为好,低于其他一般真菌。一些生理活性物质如赤霉素、三十烷醇、吲哚乙酸等对蛹虫草的生长发育也有促进作用。
(2)温度
蛹虫草属偏低温变温结实型真菌。菌丝在5~30℃内均可生长,最适温度为18~23℃,原基形成以15~18℃为宜,原基分化时需较大温差刺激(8~10℃)。子实体生长温度10~26℃,最适温度20~22℃。
(3)水分
培养基含水量要求为58%~65%,低于55%,菌丝生长缓慢,高于65%,培养基易酸败。子实体发生和生长阶段要求空气相对湿度达85%~90%,湿度过大,会引起子实体腐烂。注意培养基补水或补充营养液。
(4)空气
子座发生期应增大通气量,二氧化碳积累过多,子座不能正常分化或出现密度大、子座纤细。
(5)光线
菌丝生长时不需要光,光照会使培养基颜色加深,易形成气生菌丝,并使菌丝提早形成菌被。但原基分化需明亮均匀的漫射光,光线不均匀会使子实体产生扭曲或倒向一边。光照强度需100~200勒克斯,光线过弱,原基分化困难,出草少,子实体呈淡黄色,产质量低。
(6)酸碱度
蛹虫草喜偏酸性环境。菌丝生长适宜pH为5.4~6.8,pH大于8,菌丝难以生长。在实际生产中,为防止因灭菌和培养基产酸导致pH下降,培养基一般调至pH7.5左右。
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