产品简介
MagSilica Beads是表面修饰二氧化硅的四氧化三铁磁性微球,具有超顺磁性,在外加磁场作用下能够定向移动。MagSilica Beads表面具有丰富的活性基团,在高盐情况下可以与DNA进行高效结合,低盐高pH条件下与DNA进行解离,从而达到核酸提取的目的。核酸提取流程主要包括:样本处理-结合-洗杂-洗脱,最后得到高纯基因产物可用于PCR、载体构建、核酸杂交等下游实验。
粒径小,比表面积大,可高效结合核酸,满足微量生物样本核酸提取的要求;
不需要使用酚、氯仿等有毒试剂,绿色环保;
耗时少,操作简单,适用于大多数生物样本;
可进行自动化提取,减少手动操作误差,满足临床高通量、高灵敏度的需求;
磁珠性能:
磁珠浓度:10mg磁珠/ml
磁珠载量:>10μg plasmid DNA/mg磁珠
则每ul能够提取核酸量为:
磁珠价格:
以笔者购买的天地人和公司出品的磁珠,价格为5ml 300元RMB。
关于磁珠说明:
静置时,磁珠因重力作用沉淀于瓶底部,因此使用前需涡旋振荡,使磁珠充分重悬,然后用剪去尖端的枪头吸取适量磁珠。
优点:
可批量、自动化(自动化:真空吸液系统);
回收效率高,20ul即可实现高浓度回收;
相较于过柱法、沉淀法,全程操作简单、便捷、省时高效,
提取步骤:
优点:
可批量、自动化(自动化:真空吸液系统);
传统沉淀法富集RNA,并不能沉淀所有RNA,且在随后洗涤过程中也会损失部分RNA。对于微量组织样本而言,沉淀法产量极低,因此可以通过磁珠法替代。
配套设备:
鉴于实验条件,笔者根据已有废旧器材组装改造了一个简易版的真空吸液器,可极大提升实验效率,节省时间。
后话:
随着科技的突飞猛进,自动化渗透到各个领域,应用越来越广泛。
以科研领域的核酸纯化为例,高通量的核酸提取纯化已经屡见不鲜,然而这种自动化也多在生物高科技公司或研究院所推广,反而高校却未大范围应用,即便当下纯化系统设备价格已经降至8万左右,其中一个重要的原因就是高校有源源不断的研究生作为劳动输入,以传统手工抗衡着自动化。
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
核酸提取或纯化技术主要有三类:
1、传统方法(操作复杂,耗时长)
2、离心柱法(试剂盒)
3、磁珠法(可单独采购磁珠或买成品试剂盒)
其中,磁珠法可实现自动化操作,是目前比较主流的方法。
核酸提取应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。
扩展资料:
核酸提取的注意事项:
1、仪器的安装环境:正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃、相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下。
2、避免将仪器放置在靠近热源的地方,如电暖炉;同时为防止电子元件的短路,应避免水或者其他液体溅入其中。
3、进风口和排风口均位于仪器背面,同时避免灰尘或纤维在进风口聚集,保持风道的畅通。
4、核酸提取仪离其他竖直面至少10cm。
5、仪器接地:为了避免触电事故,仪器的输入电源线必须接地。
6、远离带电电路:操作人员不得擅自拆解仪器,更换元件或进行机内调节必须有持证的专业维修人员完成,不要在接通电源的情况下更换元件。
磁珠法核酸提取过程:
1、裂解
取抗凝全血到1.5mLEP管中,加入BufferA、BufferB,混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15~20min。
2、结合
将EP管从温育设备中取出,离心后取上清,加入振荡混匀的磁珠结合液,颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。
3、洗涤
⑴ 加入洗涤液Ⅰ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑵ 加入洗涤液Ⅱ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑶ 重复步骤⑵一次;
⑷ 室温下开盖干燥。
4、洗脱
加入洗脱液,放置水浴锅中温育后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。
以上就是关于磁珠法核酸纯化的半自动化实践 - 草稿全部的内容,如果了解更多相关内容,可以关注我们,你们的支持是我们更新的动力!



















